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1.4转移GEMs
发布日期:2018-01-25  查看次数: 0 次  
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10x Genomics实验的具体操作流程

程序结束后,立刻将Emulsions转移入PCR管或eppendorf的PCR板中,立刻转移获得的GEMs

  打开芯片盖向后折叠至锁扣锁住

  这样回收孔与桌面形成45度夹角,观察确认各个通道中液体体积是否均等

  缓慢从回收孔中吸取100ul的GEMs,注意枪头不要紧贴孔的底部

  同时避免产生气泡,取出移液器

  确保吸头中没有气泡产生

  在所有吸头中的GEMs应该是浑浊和均一的

  然后,转移Emulsions到新的PCR管中

  当在转移到eppendorf 8连管或PCR板的过程中

  要注意等待1分钟使吸头中的所有残留液体集中到枪头底部

  再次打入PCR管或板中,确保转移完全

切记:某些塑料会导致GEMs反应的不稳定,选用能保持乳化液滴稳定的耗材是十分重要的

  请使用在我们的操作手册中验证过的塑料材质。

  一旦我们将GEMs转移入PCR管中,立即盖上盖子

  将PCR管放入PCR仪器并启动反转录程序

  之后进入GEM破油和第一链cDNA纯化


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